『抗体』中科院院士:部分新冠病毒抗体已在药监局报备( 二 )
自我"隔离"过程中 , 陈德喜和家人有个约定 , 工作时间 , 不发微信 , 不打电话 。 确实 , 他一忙起来 , 根本顾不上看手机 。 "每天争取下班后和家里人通一次视频 。 "陈德喜说 , "和爱人、孩子聊几句 , 感觉一下就放松了 。 "
不仅仅是陈德喜 , 研究所中有很多人都提前结束了春节假期 , 坚守岗位 , 随时投入抗"疫"攻关中 。 研究人员时红林还主动给陈德喜打电话 , 愿意第一个上岗 。 后来 , 她进入隔离区 , 加入检测新型冠状病毒的队伍 。
2020年2月14日18时 , 因为疫情 , 大街上很冷清 。 佑安医院里也变得空空荡荡 。 核酸筛查室里还亮着灯 , 安静得可以听到呼吸声 。
此时 , 陈德喜和团队开始了第一次实验 , 他很少说话 , 密切关注着每一个实验细节 。 "科学容不得一丝马虎 。 "
实验的过程十分枯燥 。
实验只能从18时开始 , 因为此时 , 才能开始分离患者血细胞 。 等真正拿到"素材"需要到23时或24时 。 之后还需要精心计数细胞数量和计算活细胞比率 , 再经浓缩细胞 , 让其达到上仪器的标准 。 一般一次实验的过程是连续36个小时 , 中间不能有丝毫松懈 。 "负责仪器运转的博士庞丽君付出了极大的辛苦 , 每次都是从头天18时开始工作 , 第二天13时工作才结束 。 "陈德喜说 。
科学是反复"试错"的研究过程 。 不眠不休 , 目不转睛 , 也不一定就有结果 。
【『抗体』中科院院士:部分新冠病毒抗体已在药监局报备】预实验阶段 , 有一次实验进行了14个小时 , 发现结果显示不出来 。 陈德喜赶紧停止实验 , 一步一步倒推 , 才最终找到错误的原因 。 陈德喜没时间感慨 , 他立即排除错误 , 重新开始实验 , "千万不能影响下一步的实验 , 时间紧迫啊!"
实验过程中 ,Beacon(一台单细胞平台)立了大功 。 这种实验设备 , 一般大型药厂才会配备 , 主要是为了加速抗体药物的研发 。 大学实验室里并不多见 , 国内目前只有四五台类似设备 。 恰巧 , 北京有一台 。
其实 , 哪里有什么"恰巧" 。 北京市肝病研究所的这台Beacon , 是陈德喜力主 , 在市级财政支持下购置的 。 "当时购买就是认识到感染与传染性疾病走到现在 , 其瓶颈就是以抗体为基础的微生物诊断和治疗 。 "陈德喜说 。
如果描述实验过程 , 对于普通人来说 , "字都认识 , 但就是看不懂" 。 不过 , 实验过程中的一些数据 , 足以说明陈德喜和团队的精益求精 , 科学严谨--
"每个培养孔大约0.24纳升 。 1纳升等于0.000001毫升 。 "
"先导入分泌抗体的细胞 , 再导入表达ACE2(新型冠状病毒的受体)的细胞 , 可一次导入4个以上(考虑到病毒感染细胞的感染率问题 , 每个培养孔需要导入多个) 。 "
……
经过培养 , 如果表达ACE2的细胞开始"发光" , 说明被感染 , 如果不表达 , 说明被中和 。
到了这一步 , 并非终点 , 只是另一种开始 。 陈德喜和团队还要不断地筛选 , "每三到五个氨基酸就会产生一个抗体 , 这些抗体强弱不一 , 有些抗体具有中和活性 , 有些具有诊断价值 , 我们要找到的就是具有高中和活性的中和抗体产生B细胞 。 "
截至目前 , 陈德喜和团队 , 已从佑安医院收集了20例治愈后随访的新冠肺炎患者全血 , 每人10毫升 , 进行了6次抗体筛选 。 然后利用Beacon筛选单个抗体分泌B细胞 , 经过单细胞导入、抗体分泌检测、阳性细胞导出等步骤获得阳性单克隆B细胞600余株 , 已建立了单个B细胞cDNA文库500个 , 经抗体可变区PCR(聚合酶链式反应)后 , 获取100余个H链和L链同时阳性克隆 。
从3月7日到13日 , 陈德喜和团队通过抗体小样验证 , 已经获取了针对新型冠状病毒刺突蛋白spike和N蛋白的特异抗体上百株 , "我们建立的这个库的'库存'足够大 , 有望从中找到高效诊断以及中和抗体 。 "陈德喜说 。
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