泽平科技|用于多克隆抗体的动力学、亲和力检测，Attana蛋白互作分析系统( 二 )
如上所述 ， 多克隆抗体样品的异质性 ， 很可能导致不同的亲和力 。 这也提示将简单的动力学相互作用模型与数据相匹配的可能性 。 图1中的A图 ， 显示在解离阶段的第一部分有相当高的解离速度 ， 表明亚群与抗原形成相对不稳定的复合物 。 此后 ， 解离速率稳定下来 ， 代表与抗原形成相对稳定复合物的亚群 ， 并且从这部分解离阶段获得的数据显示与1:1相互作用模型有更好的一致性 。
此外 ， 如果使用传感器表面固定抗原的方式进行实验 ， 为了表征二价或多价抗体 ， 必须非常小心地测量亲和力而不要测结合总亲和力 。 我们以前的数据显示 ， 使用Attana羧基或生物素传感器芯片 ， 可以非常精确地滴定表面抗原密度 ， 以避免由高表面密度引起的总亲和力效应 。 这是在上述实验开始之前对两种抗原进行的 。 实验结论
1、本实验使用Attana蛋白互作分析系统 ， 开发了一种方法 ， 可以实时、无标记地测量多克隆抗体与多肽和蛋白质抗原的相互作用 。
2、通过使用该方法 ， 可以导出相互作用的动力学信息 ， 例如结合(kon)和解离(koff)速率常数 ， 并计算相互作用的亲和力 。
3、该方法可用于监控多克隆抗体的纯化效率、比较不同免疫的效果、监测滴度变化等 。
4、该实验可针对固定的抗原筛选多克隆抗体 ， 节省时间且成本低 。
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