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新技术可灵敏检测基因编辑是否脱靶( 二 )

GOTI颠覆了原有的脱靶检测手段 。 实验的精妙之处是利用小鼠胚胎做实验 。 在受精卵分裂成两个时 ， 基因编辑其中的一个 ， 并用红色荧光蛋白进行标记 。 编辑之后 ， 让两个细胞继续分裂 ， 等小鼠胚胎发育到14.5天时 ， 基于红色荧光蛋白筛选出基因编辑细胞和没有基因编辑的对照细胞 。

由于这两组细胞基因背景完全一致 ， 且无需基因组体外扩增 ， 避免了遗传背景的干扰 ， 同时还可以清楚地展现单个碱基的突变 ， GOTI因此展现出强大的灵敏性 ， 对数量极少的基因编辑脱靶也可感知 。

此外 ， 研究人员使用GOTI技术发现BE3单碱基编辑会产生大量脱靶突变 。 这一发现使人们重新审视原本认为“特别安全、几乎不会有脱靶”的单碱基突变技术 ， 并为基因编辑工具的安全性评估带来了突破性的新技术 ， 有望成为新的行业检测标准 。 相关研究结果于3月1日发表在《科学》上 。


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