ms培养基的配制步骤,配制培养基的步骤?( 二 )


琼脂斜面培养基应在灭菌后立即取出,冷至55℃-60℃时,摆置成适当斜面,待其自然凝固 。
9、培养基的质量测试
每批培养基制备好以后,应仔细检查一遍,如发现破裂、水分浸入、色泽异常、棉塞被培养基沾染等、均应挑出弃去 。并测定其最终pH 。
将全部培养基放入36±1°C恒温箱培养过夜,如发现有菌生长,即弃去 。
用有关的标准菌株接种1~2管或瓶培养基,培养24~48小时,如无菌生长或生长不好 。应追查原因并重复接种一次,如结果仍同前,则该批培养基即应弃去,不能使用 。
10、培养基的保存
培养基应存放于冷暗处,最好能放于普通冰箱内 。放置时间不宜超过一周,倾注的平板培养基不宜超过3天 。每批培养基均必须附有该批培养基制备记录副页或明显标签 。
Q2:培养基制备有几个主要步骤培养基制备的四个主要步骤:
1、计算:根据培养基配方的比例,计算各种成分的用量;
2、称量:准确称取各种成分;
3、溶化:将各种成分加入烧杯,加热,用玻璃棒搅拌溶解,加入琼脂使其熔化后,补加水至一定量;
4、调节PH值 。
Q3:微生物培养基配置的基本步骤?1,配方制定,确定配置体积,计算要配制体积下的各组分需称量的质量.
2,称量.
3,溶解.
4,定容,用蒸馏水补加,将配制的溶液体积达到规定体积.
5,分装.
6,消毒.
7,使用.
注,固体培养基的情况略有不同,分装有区别.
Q4:配制培养基的基本步骤有哪些?应注意什么问题按配方计算培养基中各种成分的用量→称量,(一般动作要迅速一些,因为其中可能有些成分容易吸潮)→溶化(将称好的各种成分溶解在水中,如果是固体培养基,需要使用凝固剂,如琼脂等,熔化时,注意搅拌,防止糊底)→调pH→灭菌(高压蒸汽灭菌)→倒平板
Q5:配制培养基的步骤?1、配制溶液
向容器内加入所需水量的一部分,按照培养基的配方,称取各种原料,依次加入使其溶解,最后补足所需水分 。对蛋白胨、肉膏等物质,需加热溶解,加热过程所蒸发的水分,应在全部原料溶解后加水补足 。
配制固体培养基时,先将上述已配好的液体培养基煮沸,再将称好的琼脂加入,继续加热至完全融化 。并不断搅拌,以免琼脂糊底烧焦 。
2、调节pH值?
用pH试纸(或pH电位计、氢离子浓度比色计)测试培养基的pH值,如不符合需要,可用10%HCl或10%NaOH进行调节,直到调节到配方要求的pH值为止 。
3、过滤
用滤纸、纱布或棉花趁热将已配好的培养基过滤 。用纱布过滤时,最好折叠成六层,用滤纸过滤时,可将滤纸折叠成瓦棱形,铺在漏斗上过滤 。
4、分装
已过滤的培养基应进行分装 。如果要制作斜面培养基,须将培养基分装于试管中 。如果要制作平板培养基或液体、半固体培养基,则须将培养基分装于锥形瓶内 。
分装时,一手捏松弹簧夹,使培养基流出,另一只手握住几支试管或锥形瓶,依次接取培养基 。分装时,注意不要使培养基粘附管口或瓶口,以免浸湿棉塞引起杂菌污染 。
装入试管的培养基量,视试管和锥形瓶的大小及需要而定 。一般制作斜面培养基时,每只15×150毫米的试管,约装3~4毫升(1/4~1/3试管高度),如制作深层培养基,每只20×220毫米的试管约装12~15毫升 。每只锥形瓶装入的培养基,一般以其容积的一半为宜 。
5、加棉塞?
分装完毕后,需要用棉塞堵住管口或瓶口 。堵棉塞的主要目的是过滤空气,避免污染 。棉塞应采用普通新鲜、干燥的棉花制作,不要用脱脂棉,以免因脱脂棉吸水使棉塞无法使用 。
制作棉塞时,要根据棉塞大小将棉花铺展成适当厚度,揪取手掌心大小一块,铺在左手拇指与食指圈成的圆孔中,用右手食指插入棉花中部,同时左手食指与姆指稍稍紧握,就会形成1个长棒形的棉塞 。
棉塞作成后,应迅速塞入管口或瓶口中,棉塞应紧贴内壁不留缝隙,以防空气中微生物沿皱折侵入 。棉塞不要过紧过松,塞好后,以手提棉塞、管、瓶不下落为合适 。棉塞的2/3应在管内或瓶内,上端露出少许棉花便于拔取 。塞好棉塞的试管和锥形瓶应盖上厚纸用绳捆札,准备灭菌 。
6、制作斜面培养基和平板培养基
培养基灭菌后,如制作斜面培养基和平板培养基,须趁培养基未凝固时进行 。
(1)制作斜面培养基 。在实验台上放1支长0.5~1米左右的木条,厚度为1厘米左右 。将试管头部枕在木条上,使管内培养基自然倾斜,凝固后即成斜面培养基 。


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