让基因编辑脱靶无处躲藏( 五 ) 全新检测基因

理想很美好，现实很残酷。如何提升检测脱靶效应的精度？答案是：彻底颠覆原有的脱靶检测手段。

为实现这一目标，杨辉研究组与合作者建立了一种名叫“GOTI”的脱靶检测技术。研究者们在小鼠受精卵分裂到二细胞期的时候，编辑一个卵裂球，并使用红色荧光蛋白将其标记。当小鼠胚胎发育到14.5天时，将整个小鼠胚胎消化成为单细胞，再利用细胞分选技术，基于红色荧光蛋白分选出基因编辑细胞和没有基因编辑的细胞，并进行全基因组测序，比较两组差异。这样就避免了单细胞体外扩增带来的噪音问题。

“由于实验组和对照组来自同一枚受精卵，理论上基因背景完全一致。因此，直接比对两组细胞的基因组，其中的差异基本就可以认定是由基因编辑工具造成的。这样便能发现此前脱靶检测手段无法发现的完全随机的脱靶位点。 ”该课题合作开发者、中国农业科学院深圳农业基因组研究所研究员左二伟解释。