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「洪泰吃糖会」第6期——生物医药企业如何接住疫情背景下的行业利好？( 二 )


DPP4抑制剂可以帮助某些新冠病毒感染
。 DPP4遍布全身 ， 但其活性仅被部分了解 ， 该酶在炎症反应和胰岛素调节中起着重要作用 。 DPP4抑制剂可增加胰岛素和GLP-1的分泌 ， 通常用于2型糖尿病患者 。
如果阻断DPP4活性 ， 则减轻炎症反应 。 这可以改善对病毒的免疫反应
。


分享嘉宾
：
泽成生物创始人刘振世博士


分享主题
：新冠病毒与抗体的检测流程与方法



泽成生物
：以全自动化学发光整体解决方案为主要产品的体外诊断企业 。


核酸检测方法

新型冠状病毒的检测方法主要包含
核酸检测、抗体检测、抗原检测
等几种方法 。 通常我们说病毒核酸检测是确诊感染的“金标准” ， 这个“金标准”就是指“阳性”结果 。
新型冠状病毒常用的核酸诊断方法有两种：病毒核酸特异基因检测和病毒基因组测序
。 最常见的检测新型冠状病毒特异性核酸序列的方法是
荧光定量PCR（聚合酶链式反应）
。
由于新型冠状病毒是RNA病毒 ， 试剂盒检测基本都采用
反转录加实时聚合酶链式反应法（RT-PCR）
，
扩增病原体的核酸 (RNA)
， 同时
通过荧光探针实时检测扩增产物
。

在PCR反应体系中 ， 包含一对特异性引物以及一个Taqman探针 ， 该探针为一段特异性寡核苷酸序列 ， 两端分别标记了报告荧光基团和淬灭荧光基团 。 探针完整时 ， 报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；如反应体系存在靶序列 ， PCR反应时探针与模板结合 ， DNA聚合酶沿模板利用酶的外切酶活性将探针酶切降解 ， 报告基团与淬灭基团分离 ， 发出荧光 。 每扩增一条DNA链 ， 就有一个荧光分子产生 。

荧光定量PCR仪能够监测出荧光到达预先设定阈值的循环数（Ct值）与病毒核酸浓度有关 ，
病毒核酸浓度越高 ， Ct值越小
。 不同生产企业的产品会依据自身产品的性能确定本产品的阳性判断值 。
核酸检测流程

检测程序需要经过五个步骤：
取样、留样、保存、核酸提取、上机检测
。


首先根据试剂盒说明书进行样本采集 ， 样本类型包括咽拭子、鼻拭子、痰液、支气管灌洗液、肺泡灌洗液等 。 由于RNA易降解 ， 因此 ，
采集样本时使用无RNA酶的拭子和无RNA酶的储存管
。

获得患者样本后 ， 需尽快进行检测 ， 如无法立即检测需要进行低温封装 ， 并送到专门的检测机构进行检测 。 检测机构收到样本后 ， 对样本进行核酸提取 ， 核酸提取试剂应使用批准产品说明书中指定的核酸提取试剂盒 。

最后是
荧光PCR核酸检测
， 也就是
上机器检测
， 将提取物进行荧光PCR扩增反应 ， 需要70—80分钟 。


特别强调：其样本主要是咽拭子或痰液 ， 据操作老师讲 ， 痰液更准一些 。 此外 ，
强调一下 ， 核酸阳性肯定是新冠感染 ， 阴性不一定不是
。
抗体检测方法

病毒侵入人体后 ， 人体会产生相应的特异性抗体进行防御 。
免疫球蛋白是机体在抗原物质刺激下由浆细胞产生的一类能与抗原特异性结合的免疫球蛋白
， 根据分子结构和抗原特异性的不同 ， 将免疫球蛋白分为五类：
IgG、IgA、IgM、IgD、IgE 。
抗原初次进入机体后 ， 经过一定的潜伏期产生浆细胞并合成分泌抗体 。 最早出现的是IgM ， 但该抗体维持时间短、浓度低、亲和力较低 ， 在血中持续数日至数周 ， 是急性期感染的诊断指标；在IgM接近消失时 ， IgG的含量达到高峰 ， IgG产生晚 ， 但浓度高、维持时间长、亲和力高 ， 血清IgG阳性提示感染中后期或既往感染 ， 当数月乃至数年再次接触相同抗原时 ， 最初原抗体量稍有下降 ， 可能是由于一部分原有抗体被再次进入的抗原所结合 ， 从而暂时降低了抗体含量 ， 但短期内抗体含量迅速增加 ， 可能比原来抗体含量高数倍至数十倍 ， 以IgG为主 ， 在体内持续时间也长 ， IgM很少增加 。


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